Электрофорез гемоглобина на уксуснокислой целлюлозе

VwYgNgbFjcVitaYo 07.12.2017 Общие сведения Оставить комментарий 18,424 Просмотры

Подробный обзор

Фруктозамин: значение определения аналита в диагностике диабета

Фруктозамин (гликозилированный белок) является продуктом гликозилирования белковых компонентов крови. Определение его уровня позволяет ретроспективно наблюдать за концентрацией глюкозы у пациентов с диабетом.

Содержание фруктозамина определяется при помощи кинетического колориметрического метода. Для исследования необходима венозная кровь. В качестве единиц измерения аналита используется мкмоль/л.

Правила подготовки к сдаче крови для определения фруктозамина

Для получения достоверных результатов необходимо:

отказаться от приема пищи за 8 часов до сдачи крови (разрешено пить негазированную воду);
минимизировать физическое напряжение за полчаса до анализа;
снизить уровень эмоциональной нагрузки за полчаса до исследования;
отказаться от сигарет за полчаса до сдачи биоматериала.

Важные теоретические аспекты

Если содержание глюкозы в крови в течение длительного времени превышено, то молекулы этого вещества будут связываться с белковыми компонентами плазмы (этот процесс называется гликированием). Уровень фруктозамина отражает среднее значение концентрации глюкозы за последние 2-3 недели.

Анализ содержания фруктозамина был введен в лабораторную практику еще в 1980-х годах. Несмотря на то, что сейчас более распространено исследование уровня HbA1c в качестве показателя мониторинга за состоянием пациентов с диабетом, есть случаи, когда назначение анализа фруктозамина имеет большую целесообразность:

Внесение резких изменений в терапевтический курс как в плане медикаментозной коррекции, так и в плане подбора диеты.
Период беременности у пациенток с диабетом (исследование назначается параллельно с определениями уровня глюкозы).
Патологии системы крови, при которых теряется диагностическая ценность определения HbA1c (серповидно-клеточная, гемолитическая анемии и другие формы анемичных состояний).

Важно! Диапазон референсных значений фруктозамина — от 205 до 285 мкмоль/л.

Клиническое значение исследования

Необходимость в исследовании определяет лечащий врач

Чем больше будет уровень фруктозамина, тем больше и средняя концентрация глюкозы. Интерес для лечащего врача имеют не столько сами значения аналита, сколько тенденции его изменения.

Обратите внимание! Если содержание фруктозамина переходит от приемлемого к повышенному, то делается вывод о неправильном выборе стратегии терапевтической коррекции.

Уровень фруктозамина остается в пределах референсных значений при отсутствии сахарного диабета и при корректно подобранной схеме лечения этого заболевания. Снижение концентрации аналита может быть вызвано гипопротеинемией из-за нарушенного синтеза белка или потерь белковых веществ из-за некоторых патологий.

Важно! Повлиять на значение показателя могут: повышенная концентрация аскорбиновой кислоты, гипертиреоидные состояния, гемолиз и липемия в образцах крови.

Решение о необходимости определения уровней гликогемоглобина и фруктозамина принимает эндокринолог или терапевт. Эти показатели являются крайне важными для мониторинга состояния пациентов, страдающих сахарным диабетом.

В крови пять основных фракций белков

Плазма крови человека в норме содержит более 100 видов белков. Примерно 90% всего белка крови составляют альбумины, иммуноглобулины, липопротеины, фибриноген, трансферрин; другие белки присутствуют в плазме в небольших количествах.

Синтез белков плазмы крови осуществляют:

печень – полностью синтезирует фибриноген и альбумины крови, большую часть α- и β-глобулинов,
клетки ретикулоэндотелиальной системы (РЭС) костного мозга и лимфатических узлов – часть β-глобулинов и γ-глобулины (иммуноглобулины).

Существует довольно много различных методов разделения белков в зависимости от их некоторых качеств. Наиболее распространенным методом фракционирования белков крови является электрофорез..

Электрофорез белков

Ацетатцеллюлозная пленка, гель, специальная бумага (носитель) помещается на рамку, при этом противоположные края носителя свисают в кюветы с буферным раствором. На линию старта наносится сыворотка крови.

Метод заключается в движении заряженых молекул белка по поверхности носителя под влиянием электрического поля. Молекулы с наибольшим отрицательным зарядом и наименьшим размером, т.е. альбумины, двигаются быстрее остальных.

Наиболее крупные и нейтральные (γ-глобулины) оказываются последними.

На ход электрофореза влияет подвижность разделяемых веществ, находящаяся в зависимости от ряда факторов: заряд белков, величина электрического поля, состав растворителя (буферной смеси), тип носителя (бумага, пленка, гель).

Общий вид электрофореза

Количество выделяемых фракций определяется условиями проведения электрофореза.

При электрофорезе на бумаге и пленках ацетата целлюлозы в клинико-диагностических лабораториях выделяют 5 фракций (альбумины, α1-, α2-, β- и γ-глобулины), в то время как в полиакриламидном геле – до 20 и более фракций.

При использовании более совершенных методов (радиальная иммунодиффузия, иммуноэлектрофорез и других) в составе глобулиновых фракций выявляются многочисленные индивидуальные белки.

Электрофореграмма (вверху) и графический результат ее обработки (внизу)

На вид протеинограммы оказывают влияние только те белки, концентрация которых достаточно высока.

Нормальные величины белковых фракций плазмы крови

Общий белок	взрослые	65-85 г/л
дети 1-3 года	55-85 г/л
Белковые фракции
Альбумины	50-70 %	30-50 г/л
α1-Глобулины	3-6 %	1-3 г/л
α2-Глобулины	9-15 %	6-10 г/л
β-Глобулины	8-18 %	7-11 г/л
γ-Глобулины	15-25 %	8-16 г/л

Нормальные величины фракций белков в ликворе и моче можно посмотреть здесь.

Особенности содержания белков в крови у детей

У новорожденных содержание общего белка в сыворотке крови значительно ниже, чем у взрослых, и становится минимальным к концу первого месяца жизни (до 48 г/л). Ко второму-третьему годам жизни общий белок повышается до уровня взрослых.

В течение первых месяцев жизни концентрация глобулиновых фракций низка, что приводит к относительной гиперальбуминемии до 66-76%. В периоде между 2-м и 12-м месяцами концентрация α2-глобулинов временно превышает взрослый уровень.

Количество фибриногена при рождении гораздо ниже, чем у взрослых (около 2,0 г/л), но к концу первого месяца достигает обычной нормы (4,0 г/л).

Типы протеинограмм

В клинической практике для сыворотки выделяют 10 типов электрофореграмм (протеинограмм), соответствующих различным патологическим состояниям.

α1	α2	β	γ
Острые воспаления	↓↓	↑	↑	—	↑	Начальные стадии пневмоний, острые полиартриты, экссудативный туберкулез легких, острые инфекционные заболевания, сепсис, инфаркт миокарда
Хронические воспаления	↓	—	↑↑	—	↑↑	Поздние стадии пневмоний, хронический туберкулез легких, хронический эндокардит, холецистит, цистит и пиелит
Нарушения почечного фильтра	↓↓	—	↑	↑	↓	Генуинный, липоидный или амилоидный нефроз, нефрит, нефросклероз, токсикоз беременности, терминальные стадии туберкулеза легких, кахексии
Злокачественные опухоли	↓↓	↑↑	↑↑	↑↑↑	↑↑	Метастатические новообразования с различной локализацией первичной опухоли
Гепатиты	↓	—	—	↑	↑↑	Последствия токсического повреждения печени, гепатиты, гемолитические процессы, лейкемии, злокачественные новообразования кроветворного и лимфатического аппарата, некоторые формы полиартрита, дерматозы
Некроз печени	↓↓	—	↓	↑	↑↑	Цирроз печени, тяжелые формы индуративного туберкулеза легких, некоторые формы хронического полиартрита и коллагенозов
Механические желтухи	↓	—	↑	↑	↑	Обтурационная желтуха, желтухи, вызванные развитием рака желчевыводящих путей и головки поджелудочной железы
α2-глобулиновые плазмоцитомы	↓	↓	↑↑	↓	↓	α2-Плазмоцитомы
β-глобулиновые плазмоцитомы	↓	↓	↓	↑↑	↓	β1-Плазмоцитомы, β1-плазмоклеточная лейкемия и макроглобулинемия Вальденштрема
γ-глобулиновые плазмоцитомы	↓	↓	↓	↓	↑↑	γ-Плазмоцитомы, макроглобулинемия и некоторые ретикулезы

Вы можете спросить или оставить свое мнение.

ВКонтакте

Download SocComments v1.3

Белковые фракции

Функциональное состояние организма

Общая характеристика

Анализ фореграмм белков позволяет установить за счет какой фракции у больного имеется увеличение или дефицит белка, а также судить о специфичности изменений, характерных для данной патологии. Выделяют стандартные фракции: альбумины и фракции глобулинов (альфа1-, альфа2-, бета- и гамма-глобулины).

Глобулиновые фракции более разнородны. Фракция альфа1-глобулина включает в себя острофазные белки: альфа1-антитрипсин (основные) – ингибитор многих протеолитических ферментов – трипсина, химотрипсина, плазмина и т. д.

, а также альфа1-кислый гликопротеин (орозомукоид, имеющий много функций, в зоне воспаления способствующий фибриллогенезу.

К глобулинам относятся транспортные белки: тироксинсвязывающий глобулин, транкортин (функции – связывание и транспорт кортизола и тироксина соответственно), альфа1-липопротеин (функция – участие в транспорте липидов).

Фракция альфа2-глобулинов преимущественно включает острофазные белки – альфа2-макроглобулин, гаптоглобин, церулоплазмин. Фракция бета-глобулинов содержит трансферрин, гемопексин, компоненты комплемента и часть иммуноглобулинов. Фракция гамма-глобулинов состоит из иммуноглобулинов (в порядке количественного убывания – IgG, IgA, IgM, IgE), функционально представляющих собой антитела, обеспечивающие гуморальную иммунную защиту организма от инфекций и чужеродных веществ.

Показания для назначения

1. Нарушения питания и обмена веществ, синдром мальабсорбции.2. Острые и хронические воспалительные заболевания. 3. Новообразования

Маркер

Маркер нарушений белкового обмена.

Клиническая значимость

1. Помощь в диагностике различных заболеваний.2. Мониторинг лечения.

Метод: Колориметрия Диапазон измерений: 20-120 Единица измерения: Грамм на литр

Референтные значения:

Метод: Расчетный метод

Референтные значения: