Определение количества тромбоцитов (Brecher et al., 1953)

Суть данного анализа

Далеко не каждый пациент знает, что представляет собой подсчёт количества тромбоцитов по Фонио. Он осуществляется на 1000 эритроцитов в материале, смешанном со специальным реактивом-красителем. После этого полученное число пересчитывается в отношении на 1 мкл или 1 литр крови. Достоинством этого метода является достаточно точное определение количества этих кровяных клеток, что, естественно, ведет к более точной постановке диагноза.

Разберемся, как именно осуществляют подсчет тромбоцитов по Фонио.

Общая характеристика камеры Горяева

Приспособление представлено толстым стеклом, в котором расположены углубления. Они необходимы для залития биологической жидкости человека. Сверху помещается тонкое предметное стекло, которое способствует устранению пузырьков воздуха и распределению биологической жидкости по углублению. Устройство позволяет подсчитывать количество лейкоцитов и эритроцитов с помощью микроскопа, направленного на углубление. Полученные данные подставляют в формулу, чтобы выявить число клеток в заданном объеме жидкости.

Под микроскопом врач-лаборант видит большие и малые квадраты, которые в сумме составляют 225. За одно исследование необходимо подсчитать клетки в 100 квадратах.

Обслуживание и уход за камерой Горяева

Чтобы приспособление выполняло свои функции, врач-лаборант правильно подсчитал форменные элементы, за ним необходимо ухаживать. Оно должно быть всегда чистым, стерильным. Наличие инородных предметов затруднит исследование.

В ходе работы при подсчете эритроцитов в камере Горяева выполняют следующие дезинфицирующие манипуляции:

  • с помощью марлевой салфетки, опущенной в спиртовой раствор, протирают все углубления камеры;
  • сухой марлевой салфеткой повторно протирают поверхность;
  • приспособление готово к работе, если с обеих его сторон появились радужные круги.

После окончания работы устройство дезинфицируют повторно:

  • биологическую жидкость удаляют;
  • камеру помещают в спиртовой раствор на полчаса, если используются другие дезинфектанты, время удлиняют до 60 минут;
  • приспособление достают, протирают насухо до появления радужных кругов;
  • стекло оставляют на сухой поверхности.

Моноциты %

Примечание: Эритроциты гипохромны. Анизоцитоз, пойкилоцитоз. Больной в течении длительного времени страдает язвенной болезнью желудка.

Гемограмма № 3

· Эритроциты 1.0 ´ 1012 /л

· Гемоглобин 50 г/л

· Цв. показа

· Лейкоциты: 4.0´ 109 /л

Базофилы 0 %

Эозинофилы 3 %

Палочко/яд. 3 %

Сегменто/яд. 50 %

Лимфоциты 42 %

Моноциты 5 %

· Ретикулоциты 0,1 %

· СОЭ 60 мм/час

· Тромбоциты 160´ 109 /л

Примечание: Макроцитоз, анизоцитоз, пойкилоцитоз, тельца Жолли и кольца Кебота. Единичные мегалобласты. Присутствуют гиперсегментированные нейтрофилы.

Гемограмма № 4

· Эритроциты 2.6 ´ 1012 /л

· Гемоглобин 85 г/л

· Цв. показа

· Ретикулоциты 1.5 %

· Лейкоциты: 3.5 ´ 109 /л

Базофилы 1%

Эозинофилы 5 %

Палочко/яд. 1 %

Подсчет тромбоцитов в мазке крови

Тромбоциты – это дискообразные пластинки, не имеющие ядра, которые находятся в крови человека и вырабатываются клетками костного мозга, а также участвуют в процессе остановки кровотечения.

Уменьшение или увеличение числа клеток является опасным для организма человека, поэтому огромное значение имеет определение количества тромбоцитов.

Читайте также:  Схемы AG, TA и ТА+G-CSF при миелодиспластическом синдроме (МДС) - эффективность

Методики определения числа клеток

Применяются разные методики подсчета тромбоцитов. Сейчас подсчитывание в мазке крови ведется несколькими способами:

  • Подсчитывание по методике Фонио;
  • Вычисление количества тромбоцитов камерой с использованием методики Горяева;
  • Подсчитывание с помощью автоматических электронных счетчиков;
  • С использованием люминесцентного микроскопа.

Болезнь, при которой увеличивается количество клеток, называется тромбоцитоз. При снижении – в крови возникает тромбоцитопения.

Норма у здорового человека:

У взрослых мужчин и женщин 180-320*109/л
У беременных 150-380*109/л
У детей от 0 до 12 месяцев 100-420*109/л
У старших детей 180-320*109/л

Подсчитывание числа тромбоцитов по Фонио

Исследование по методике Фонио применяется наиболее часто. Оно базируется на определении количества пластинок в окрашенных мазках крови с использованием химреактивов:

  • сульфат магния 14%;
  • этилендиаминтетраацетат (ЭДТА) натрия 6%.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови

Ход исследования

Сульфат магния или ЭДТА при помощи капилляра Панченкова помещают в стеклянную пробирку, туда же помещают капиллярную кровь, которую берут, используя тот же капилляр.

Кровь с реактивом перемешивают, а затем из полученного раствора готовят материал для определения.

Для этого на предметное стекло наносятся тонкие мазки, они фиксируются и окрашиваются:

  • с применением магния сульфата – 2-3 часа;
  • с использованием ЭДТА – 30-45 минут.

После высыхания мазки разглядывают под микроскопом, у которого имеется иммерсионный объектив для увеличения изображения и усиления яркости.

Кровяные пластинки должны располагаться по отдельности, чтобы этого добиться используется самое тонкое место мазка.

Подсчет тромбоцитов в мазке крови

Как считать тромбоциты в мазке крови?

Для подсчета мазок передвигается под объективом микроскопа, чтобы были подсчитаны 1000 эритроцитов. Затем считают находящиеся среди них кровяные пластинки.

При известном количестве эритроцитов в одном литре крови, можно произвести подсчет абсолютного числа тромбоцитов.

Определение количества при помощи камеры Горяева

По методу Горяева тромбоцитарные пластинки считает камера с применением цитратного вещества. Число клеток определяют в 1 МК/л или в литре крови.

Читайте также:  Пурпура пигментная хроническая

Для этого используют следующие химреактивы:

Химреактив №1:

  • гидрохлорид кокаина 3 г;
  • хлорид натрия 0,25 г;
  • фурацилин 0,25 г;
  • вода 100 мл.

Химреактив №2:

  • 1% раствор оксалата аммония. Раствор надо прокипятить, профильтровать и после этого он хранится на холоде. При помощи этого реактива растворение эритроцитов происходит быстрее.

Подсчитывание с помощью счетчиков

Счетчик называется автоматический гематологический аппарат. С его помощью можно определить количество кровяных пластинок, также сделать гистограмму (распространение по величине).

Аппаратное исследование достаточно точное, делается экспресс-методом, который выдает результаты в течение 1 минуты.

Более дешевые модели счетчиков только определяют число, а усовершенствованные приборы делают качественный обзор целого комплекса клеток, куда входит:

При помощи аппаратного гематологического счетчика можно также построить график расположения клеток по размеру.

Методика люминесцентной микроскопии с помощи лампы считается устаревшим. Для определения тромбоцитов получил меньшее распространение и сейчас почти не используется.

Для обзора и подсчитывания клеток крови используют различные методы микроскопического исследования, а также гематологические электронные счетчики.

Внедрение новых технологий для изучения состава клеток позволит исключить ошибки лаборантов и добиться более высокой точности и качества диагностики.